Diolch am ymweld â Nature.com.Mae gan y fersiwn porwr rydych chi'n ei ddefnyddio gefnogaeth CSS gyfyngedig.I gael y profiad gorau, rydym yn argymell eich bod yn defnyddio porwr wedi'i ddiweddaru (neu analluogi Modd Cydnawsedd yn Internet Explorer).Yn y cyfamser, er mwyn sicrhau cefnogaeth barhaus, byddwn yn gwneud y wefan heb arddulliau a JavaScript.
Nodweddir anhwylder straen ôl-drawmatig (PTSD) gan nam yn y gallu i niwtraleiddio ymatebion ofn i giwiau sy'n gysylltiedig â thrawma.Mae astudiaethau dynol ac anifeiliaid yn tynnu sylw at wahaniaethau yng nghynnwys rhai rhannau o'r cortecs blaen fel cyfryngwyr allweddol sy'n pennu llwyddiant atal ofn, ond nid yw cydadwaith cylchedau niwral sy'n pennu cyfranogiad gwahaniaethol yr ardaloedd hyn yn glir.Er mwyn deall yn well sut mae gwahaniaethau unigol mewn galw difodiant yn cael eu hadlewyrchu mewn gwahaniaethau mewn gweithgaredd cylched niwronau, gwnaethom labelu amcanestyniadau o'r cortecs arucheltig llygod mawr (IL) gyda olrheinwyr ôl -dynnu a chymharu rhagamcanion niwronau y tu mewn a'r tu allan i niwronau taflunio IL.Gwnaethom ddadansoddi'r data hyn, gan eu grwpio yn ôl graddfa cadwraeth cof pylu mewn llygod mawr.Canfuom fod niwronau yn y parathalamws posterior yn arddangos mwy o weithgaredd mewn llygod mawr mewn llygod mawr, a oedd yn arddangos galw difodiant da mewn celloedd.Yn ogystal â chelloedd sy'n taflunio IL, gwelwyd mwy o weithgaredd FOS mewn ardaloedd dethol o'r llygoden fawr clawstrwm a hipocampws fentrol gyda datrysiad da.Mae ein canlyniadau'n dangos bod gwahaniaethau mewn galw difodiant yn gysylltiedig â phatrymau penodol o weithgaredd niwral o fewn a thu allan i amcanestyniadau IL.
Mae cyflyru ofn yn digwydd pan fydd ysgogiad niwtral yn gysylltiedig ag ysgogiad diamod gwrthwynebus (UCS), fel bod yr ysgogiad niwtral yn wreiddiol, sydd bellach yn ysgogiad cyflyredig (CS), yn ennyn ymateb ofn cyflyredig (CR) yn absenoldeb yr UCS.Cafodd gwrthdroi ofn cyflyredig ei yrru gan ostyngiad yn CR i CS oherwydd cyflwyno CS dro ar ôl tro yn absenoldeb UCS1.Mae ymchwil flaenorol wedi dangos bod anhwylder straen wedi trawma (PTSD) yn gysylltiedig ag anallu i gofio difodiant ymatebion ofn cyflyredig2.Mae conglfaen therapi ymddygiad gwybyddol ar gyfer trin anhwylder straen wedi trawma yn therapi amlygiad yn seiliedig ar ddifodiant ymatebion ofn dysgedig3,4.Felly, gallai astudiaethau o wahaniaethau unigol mewn ofn difodiant cnofilod a mecanweithiau niwral sylfaenol helpu i egluro gwahaniaethau mewn ymatebion dynol i drawma a thrin anhwylder straen wedi trawma.Er gwaethaf cynnydd wrth nodi'r mecanweithiau niwral sy'n gwahaniaethu'n llwyddiannus i atgofion difodiant aflwyddiannus, mae llawer i'w ddarganfod o hyd.
Mae modelau cnofilod yn ddefnyddiol yn y gwaith hwn oherwydd mae gwahaniaethau unigol sylweddol o ran atgof o ddifodiant cnofilod7,8,9,10.Mae gwaith blaenorol sy'n ymchwilio i fecanweithiau niwral difodiant ofn ar lefel y boblogaeth wedi dangos bod angen actifadu'r cortecs infralibig (IL) ar gyfer dwyn i gof difodiant (Cyfnodau 11, 12, 13, ond gweler 14), ac mae rhai astudiaethau wedi canfod gostyngiad yn Gweithgaredd cnofilod mewn IL sy'n arddangos cof gwael am ddifodiant o'i gymharu â chnofilod, sydd ag ofn da.Fodd bynnag, mae'r mecanweithiau y mae ILs yn ymwneud yn wahanol â hwyluso ofn dileu ofn mewn cnofilod o'u cymharu â'r rhai sy'n dangos difodiant gwannach yn aneglur.
Un posibilrwydd yw bod gwahaniaethau mewn cof difodiant ofn rhwng unigolion yn ganlyniad i actifadu gwahaniaethol ILs afferent penodol.Mae astudiaethau anatomegol18 wedi dangos bod amrywiol ardaloedd cortical ac isranc yr ymennydd yn anfon rhagamcanion trwchus i IL, sydd yn ei dro yn anfon rhagamcanion efferent i lawer o rannau o'r ymennydd.Mae astudiaethau ar lefel y boblogaeth wedi dangos bod rhagamcanion IL i'r amygdala yn bwysig ar gyfer caffael ofn difodiant20,21,22 ac mae mewnbwn IL o'r amygdala basolateral (BLA) hefyd yn gysylltiedig â dysgu difodiant.Mae llai o ymchwil ar gyfranogiad cylchedau sy'n canolbwyntio ar IL wrth alw difodiant yn ôl, er bod gwaith diweddar yn awgrymu bod yr hipocampws fentrol a dorsal yn ymwneud â rhagfynegiad IL.Mae'n debyg bod rhagamcanion effeithiol yr IL i gnewyllyn ailgyfuno'r thalamws hefyd yn cymryd rhan er cof am ddifodiant ofn.
Mae'r astudiaethau blaenorol hyn yn dechrau paentio llun o ryngweithio cylchedau niwral sy'n gysylltiedig â galw difodiant yn ôl, ond ychydig iawn o ddata sydd ynghylch a yw gweithgaredd mewn cylchedau niwral sy'n canolbwyntio ar IL yn dylanwadu ar wahaniaethau unigol mewn galw difodiant.Yma, gwnaethom geisio penderfynu a yw gwahaniaethau mewn cof difodiant ofn rhwng unigolion yn gysylltiedig â newidiadau mewn actifadu mewnbwn IL mewn rhanbarthau ymennydd penodol.Yn benodol, gwnaethom asesu actifadu celloedd afferent IL yng nghnewyllyn paraventricular y thalamws (PVT), clavicle (CLA), BLA, a hipocampws fentrol (VHPC).Dewiswyd y rhanbarthau ymennydd hyn oherwydd eu bod yn anfon rhagamcanion trwchus i IL ac oherwydd bod rheswm i amau ​​y gallent fod yn rhan o fynegiant ofn difodiant 18.Er enghraifft, dangosodd astudiaeth ddiweddar fod angen PVT, rhanbarth y gwyddys ei fod yn gysylltiedig â chaffael ac atgenhedlu ofn, ar gyfer atgenhedlu difodiant.Yn ogystal, mae astudiaethau blaenorol wedi dangos mwy o weithgaredd amygdala a VHPC gwaelodol mewn llygod mawr sy'n mynegi cof difodiant.Yn olaf, mae'r dadansoddiad o'r clawstrwm yn fwy archwiliadol o ystyried nad oes yr un o'r gwaith blaenorol wedi asesu ei rôl wrth ddifodiant.Fodd bynnag, mae gwaith diweddar yn awgrymu ei fod yn chwarae rôl wrth gyflyru cyd -destunol ofn29.
Chwistrellwyd olrheinwyr ôl-dynnu GFP-gyfun firaol i mewn i IL llygod mawr cyn profi ymddygiad, a mesurwyd gweithgaredd FOS mewn afferents IL yn ystod ailchwarae difodiant, galw ofn atgof, ac mewn llygod mawr nad oeddent yn destun profion ymddygiad.Mae ein canlyniadau'n dangos bod rhagamcanion o'r thalamws paraventricular posterior i IL yn dangos mwy o weithgaredd mewn llygod mawr sy'n cofio difodiant yn llwyddiannus.Yn ogystal â rhagfynegiadau IL, cynyddwyd gweithgaredd niwral mewn rhai rhannau o'r clavicle a hipocampws fentrol mewn llygod mawr a oedd yn atchweliad yn dda.Mae ein canlyniadau'n dangos bod patrymau gweithgaredd niwral cynhenid ​​ac anghynhenid ​​a ragamcanir ar IL yn gysylltiedig â gwahaniaethau unigol yng nghof difodiant ofn.
Defnyddiwyd pum deg pedwar o lygod mawr Sprague-Dawley gwrywaidd oedolion (300-325 g wrth gyrraedd) a gafwyd gan Charles River Laboratories (Raleigh, NC) fel pynciau.Roedd y llygod mawr yn cael eu cartrefu mewn parau, gyda mynediad am ddim i fwyd a dŵr, ar gylch golau/tywyll 12 awr (goleuadau ymlaen am 7 am).Defnyddiwyd dau grŵp o lygod mawr (n = 28 a n = 26) ar gyfer yr arbrofion hyn.Ar ôl eithrio marwolaeth, gwall llawfeddygol, diffyg mynegiant GFP ar y safle targed, ansawdd meinwe wael, a phroblemau ymddygiad (a eglurwyd mewn dulliau), roedd y grŵp galw difodiant yn cynnwys 21 llygod mawr ac roedd y grŵp Fear Dwyn i gof yn cynnwys 7 llygoden fawr, cewyll tŷ.Roedd y grŵp yn cynnwys 7 llygoden fawr (cafodd 35 llygod mawr eu cynnwys yn y dadansoddiad terfynol).Cymeradwywyd yr holl weithdrefnau gan Bwyllgor Gofal a Defnydd Anifeiliaid Sefydliadol Prifysgol Stony Brook ac roeddent yn unol â'r canllawiau cyrraedd (https://arriveGuidelines.org) a chanllawiau NIH ar gyfer gofal a defnyddio anifeiliaid labordy.
Cafodd llygod mawr eu trin ddeuddydd cyn llawdriniaeth.Cafodd llygod mawr eu anaestheiddio â cetamin (87 mg/kg) a xylazine (10 mg/kg), eu gosod mewn cyfarpar ystrydebol (stoelio, woodale, IL) a derbyniwyd pigiadau unochrog o AAVRG-CAG-GFP (addgene, 30) i mewn i IL.(Cydbwyso pigiadau chwith a dde).Ar gyfer pigiad, gostyngwyd canwla 22 medr i'w le (AP: + 3.00, ml: ± 0.6, dv:-5.2).Mewnosodwch ganwla mewnol 28g (wedi'i gysylltu â phwmp trwyth trwy diwb PE 20) yn y canwla canllaw i ddanfon 0.6 µl o firws ar gyfradd o 0.15 µl y funud a'i adael yn ei le am 5 munud ar ôl i'r trwyth gael ei wneud yn gyfan..Ar ôl eu newid, chwistrellwyd y llygod mawr â meloxicam (1 mg/kg) a chyn gynted ag y byddent yn gallu symud fe'u dychwelwyd i'w cewyll.Cadwyd y llygod mawr yn eu cewyll am oddeutu 7 wythnos i ganiatáu adfer firws a chludiant yn ôl.Bu farw tri llygoden fawr o dan anesthesia, gan arwain at 51 llygod mawr (94%) yn gwella'n llwyddiannus o'r llawdriniaeth.
Perfformiwyd yr holl weithdrefnau mewn siambrau cyflyru 32 cm × 25 cm × 21 cm (Clever Systems Inc., Reston, VA) wedi'u cartrefu mewn blychau ynysu sy'n amsugno sain 45.7 cm × 43.2 cm × 43.2 cm (Clyfar Sys. Inc.).).Yn ystod y sesiynau dysgu difodiant a dwyn i gof difodiant, newidiwyd y cyd -destun i fod yn wahanol i'r cyd -destun amodol gwreiddiol.Roedd Cyflwr A (Cynhyrchu Ofn) yn cynnwys gwynias 28-folt, bylbiau golau cartref (goleuadau micro Chicago, y DU), tra bod Cyflwr B (hyfforddiant difodiant, prawf dwyn i gof difodiant, a phrawf galw ofn atgof) yn cynnwys lampau LED is-goch (Univivi IR Illuminator, Shenzhen) ., China;U48r).Yn ogystal, er bod gan gyd-destun A lawr slatio gwrth-ddirgryniad gyda waliau dur gwrthstaen a plexiglass, mae cyd-destun B yn cynnwys mewnosodiadau metel wedi'u paentio wedi'u gosod ar y llawr a'r waliau.Addaswyd siâp Cyd -destun B hefyd trwy roi mewnosodiad metel crwm 33.5 cm x 21.3 cm mewn siambr cyflyru safonol.Yn ogystal, yng nghyd -destun a sychwyd y siambrau ag asid asetig 5%, tra yng nghyd -destun B cafodd y siambrau eu sychu â 5% amoniwm hydrocsid.Yn olaf, yng nghyd -destun B, daethpwyd â'r llygod mawr i'r ystafell brawf mewn bwcedi yn hytrach na chael eu rholio o gwmpas mewn cewyll ar droliau.Cofnodwyd sesiynau ymddygiadol gyda'r camera uchaf, a bwydwyd y signal fideo o bob camera i mewn i feddalwedd (FreezeScan 2.00, Clever Sys. Inc., Reston, VA) a werthusodd ymddygiad pylu yn seiliedig ar newidiadau picsel.Dewiswyd y paramedrau fel bod ymddygiad yr pylu a amcangyfrifwyd gan y cyfrifiadur yn cyfateb yn agos i ymddygiad arsylwyr hyfforddedig a amcangyfrifwyd â llaw.Gwerth sy'n nodi canran yr amser rhewi wedi'i rolio mewn egwyl 30 eiliad.
Perfformir yr holl raglenni ymddygiadol yn ystod y rhan ysgafn o'r cylch golau/tywyll.Cafodd llygod mawr eu trin 5 diwrnod cyn dechrau'r gweithdrefnau ymddygiadol a'u cludo i'r ystafell ymddygiadol am y tridiau diwethaf o driniaeth.Ar ddiwrnod cyntaf y profion ymddygiad, rhoddwyd grŵp o lygod mawr i gofio difodiant mewn atgyrch wedi'i gyflyru gan ofn, yna eu gosod yng nghyd -destun A, o ystyried cyfnod ymgyfarwyddo 6 munud heb ei symleiddio, ac yna o ystyried y ddau gyfuniad o 4 kHz, 76 dB, 30 s, 30 s, 30 s, 30 s, .tôn a therfyniad cyffredinol, 1.0 mA, cicio 1 s (2 mun iti).Ar gyfer yr holl hyfforddiant ymddygiadol, dychwelwyd y llygod mawr i'r cewyll 2 funud ar ôl cyflwyniad olaf yr ysgogiad.Y diwrnod canlynol, gosodwyd llygod mawr o'r grŵp galw difodiant yng Nghyd-destun Ystafell B a pherfformiwyd 20 o gyflwyniadau sain (2 funud ITI) fel hyfforddiant difodiant ar ôl cyfnod sefydlu 6 munud.Drannoeth, roedd llygod mawr yn y grŵp atgenhedlu difodiant yn agored i 4 tôn yng nghyd-destun B ar ôl cyfnod ymgyfarwyddo 6 munud fel prawf difodiant.Cafodd llygod mawr yn y grŵp cof difodiant eu darlifo 60 munud ar ôl y sesiwn ymddygiadol.Roedd grŵp o lygod mawr rheoli yn ennyn atgofion ofn yn destun yr un weithdrefn ar ddiwrnod cyntaf yr ymateb a gyflyrwyd gan ofn yn y cyd-destun A. pedwar deg wyth awr yn ddiweddarach, gosodwyd y llygod mawr yng nghyd-destun Ystafell B ac roeddent yn destun 4 cyflwyniad sain (2- munud iti) fel prawf dwyn i gof.Ofn ar ôl cyfnod ymgyfarwyddo 6 munud.Cafodd llygod mawr eu darlifo 60 munud ar ôl y sesiwn ymddygiadol.Arhosodd grŵp o lygod mawr rheoli domestig yn eu cewyll cartref trwy gydol yr arbrawf ac fe'u darlifwyd ar yr un diwrnod â'r llygod mawr arbrofol.Rhannwyd pob un o'r ddau grŵp o lygod mawr yn ddwy gyfres, ac roedd nifer yr anifeiliaid ym mhob grŵp yn gytbwys rhwng cyfresi.Cafodd un llygoden fawr yn y Grŵp Atgofion Ofn ei heithrio o'r dadansoddiad oherwydd nad oedd yn dangos arwyddion o gyflyru ofn (gan rewi llai na 15% o'r amser yn ystod y prawf atgofion ofn).Gweler Ffigur 2A am ddiagram o'r llinell amser ymddygiadol.
Cafodd llygod mawr eu gorddosio â hydoddiant angheuol a mwy (100 mg/kg), yna eu darlifo â 10% PBS oer iâ ac yna fformalin clustogi 10%.Cafodd yr ymennydd ei dynnu a'i storio mewn toddiant swcros 30% mewn fformalin ar 4 ° C am oddeutu 1 wythnos.Yna cafodd yr ymennydd ei rewi a'i dorri'n cryostat 40 µm o drwch.Roedd adrannau'n cael eu storio'n olynol mewn 10% PBS ar 4 ° C.Yna, perfformiwyd immunofluorescence ar adrannau arnofio rhydd sy'n cynnwys rhanbarth diddordeb yr ymennydd.Golchwyd adrannau 3 gwaith mewn 10% PBS am 5 munud yr un.Yna cafodd yr adrannau eu deori mewn toddiant blocio 5% o serwm gafr arferol am 2 awr ar dymheredd yr ystafell, ac yna eu golchi tair gwaith arall am 5 munud yr un mewn 10% PBS.Yna cafodd adrannau eu deori dros nos ar 4 ° C. mewn gwrthgyrff cynradd (C-Fos, #2250, 1: 500) (signalau celloedd, Danvers, MA) wedi'u gwanhau mewn 1% BSA mewn 10% PBS.Drannoeth, golchwyd adrannau mewn 10% PBS am 30 munud ar 4 ° C, yna 3 gwaith am 5 munud mewn 10% PBS a'u deori â gwrthgorff eilaidd (Alexa Fluor 594 Gwrth-gwningen gafr, conjugate coch, 1: 500 ).) (Invitrogen, Carlsbad, CA) ar dymheredd yr ystafell am 2 awr.Ar ôl 3 golchiad ychwanegol mewn 10% PBS am 5 munud, gosodwyd rhannau ar sleidiau gwydr a'u selio â fflworomount-G (Invitrogen).Gweler delweddau cynrychioliadol o imiwneiddiad yn Ffigur 3G.
Defnyddiwyd microsgop fflwroleuol gan ddefnyddio camera digidol Infinity3 (Lumenera, Ottawa, Ontario, Canada) ac injan ysgafn (Lumencor, Beaverton, neu) wedi'i gysylltu â microsgop Zeiss i gaffael delweddau o bob rhanbarth o ymennydd diddordeb, gan gynnwys adrannau sy'n cynnwys adrannau sy'n cynnwys adrannau sy'n cynnwys adrannau sy'n cynnwys adrannau Il heb immunofluorescence.wedi'i berfformio i gadarnhau lleoliad cywir y safle pigiad.Cafwyd y delweddau a ddefnyddiwyd ar gyfer cyfrif celloedd ar chwyddhad 20x.Ar gyfer pob adran meinwe, cymerwch un ddelwedd gyda hidlydd sy'n caniatáu delweddu GFP ac un ddelwedd gyda hidlydd sy'n caniatáu delweddu conjugate coch fflwor Alexa yn yr gwrthgorff eilaidd, a defnyddiwyd meddalwedd delweddu (Anfeidredd Dadansoddwyd, fersiwn 3) ar gyfer delwedd troshaen.Caffael pob delwedd o bob rhan o'r ymennydd gan ddefnyddio'r un amser amlygiad ac ennill gosodiadau.Cafodd chwe llygoden fawr eu heithrio o'r dadansoddiad oherwydd bod prif drosglwyddiad y firws yn digwydd y tu allan i'r IL (cyfradd taro 88%).Cafodd wyth llygoden fawr arall eu gwahardd oherwydd, er gwaethaf y firws yn ymosod ar IL, ni wnaethant ddangos digon o fynegiant GFP ym mhob un o ranbarthau diddordeb yr ymennydd targed.Yn ogystal, gwaharddwyd un llygoden fawr oherwydd ansawdd meinwe gwael.
Addaswch ddisgleirdeb a chyferbyniad i leihau sŵn cefndir yn nelwedd J (NIH) gan ddefnyddio'r un weithdrefn ar gyfer pob delwedd.Perfformiwyd cyfrif celloedd ar gyfer cyfanswm celloedd wedi'u labelu yn ôl, cyfanswm celloedd wedi'u labelu gan Fos, a chyfanswm celloedd wedi'u labelu'n ddwbl â llaw gan yr arbrofwr, nad oeddent yn adnabod yr anifeiliaid, gan ddefnyddio ategyn cytomedr delwedd J.Cafodd cyfrif celloedd eu normaleiddio i gelloedd/mm2.Er mwyn dadansoddi mynegiant FOS mewn celloedd sy'n taflunio IL, normaleiddiwyd nifer y celloedd wedi'u labelu'n ddwbl i gyfanswm nifer y celloedd wedi'u labelu yn ôl.Ar gyfer dadansoddiad MBLA, MVHPC a PVHPC, crynhowyd a normaleiddiwyd cyfrif celloedd o sawl delwedd 20x i gelloedd/mm2.Ar gyfer dadansoddi gweddill rhanbarthau'r ymennydd, dadansoddwyd a normaleiddiwyd delwedd 20X neu gyfran o ddelwedd 20x i gelloedd/mm2.Roedd y dadansoddiad VHPC yn cynnwys CA1, CA2 a rhanbarthau VHPC israddol.Mae Ffigur 1 yn dangos rhanbarthau'r ymennydd a ddadansoddwyd gyda delweddau yn amlinellu ffin anterior-posterior yr awyren.
Byrfoddau a lleoliad rhanbarthau ymennydd o ddiddordeb.Esboniad o fyrfoddau a lleoliadau rhanbarthau'r ymennydd a roddir yn y llawysgrif.Map Ymennydd Parth Cyhoeddus wedi'i gymryd o Swanson (2004) Map yr Ymennydd: Strwythur Ymennydd y Rat, 3ydd Argraffiad, wedi'i drwyddedu o dan drwydded ryngwladol Creative Commons Attribution-Noncommercial 4.0 (https://creativecommons.org/licenses/by-nc/ 4.0) ./), ar gael i'w lawrlwytho yn https://larrynswanson.com.
Mae canran amser rhewi ar gyfartaledd dros gyfnod chwarae tôn 30 eiliad, ac eithrio ysbeidiau canolradd.Cyfrifwyd cyfraddau dwyn i gof difodiant trwy fynegi canran yr amser pylu yn ystod galw difodiant fel canran y pylu yn ystod y 4 treial hyfforddi difodiant cyntaf (pylu yn ystod pedwar tôn dwyn i gof difodiant/pylu yn ystod y pedair tôn hyfforddi difodiant cyntaf*100).Mae sgorau isel yn dynodi cof pylu da, ac mae sgorau uchel yn dynodi cof pylu gwael.Cafodd llygod mawr eu didoli yn ôl sgôr dwyn i gof difodiant, gyda llygod mawr yn nhraean uchaf y sgôr dwyn i gof difodiant a ddosbarthwyd fel “llygod mawr difodiant gwael” a dosbarthwyd llygod mawr yn y ddwy ran o dair olaf o sgôr dwyn i gof difodiant fel “da”.Cof yn pylu llygod mawr.
Defnyddir profion nonparametric oherwydd bod y data yn aml yn torri rhagdybiaethau ynghylch dosbarthu arferol a/neu homogenedd amrywiannau.Defnyddiwyd cydberthynas rheng Spearman i benderfynu a oedd cysylltiad sylweddol rhwng sgoriau galw difodiant a marcwyr FOS a marcwyr deuol yn rhanbarthau diddordeb yr ymennydd ym mhob llygod mawr a oedd yn destun y prawf galw difodiant.Defnyddiwyd prawf U Mann-Whitney i benderfynu a oedd gwahaniaeth rhwng dau grŵp annibynnol.Defnyddir y prawf Kruskal-Wallis i benderfynu a yw 2 grŵp neu fwy yn wahanol i'w gilydd, a defnyddir prawf cymhariaeth luosog Dunn pan fydd ystadegyn Kruskal-Wallis yn arwyddocaol.Aseswyd pylu yn ystod dysgu difodiant gan ddefnyddio dadansoddiad mesurau dro ar ôl tro o amrywiant gyda'r grŵp fel y ffactor rhyng-bwnc a'r prawf fel y ffactor o fewn pwnc. Ystyriwyd bod y canlyniadau'n arwyddocaol pan oedd p <0.05 ar gyfer yr holl brawf ystadegol. Ystyriwyd bod y canlyniadau'n arwyddocaol pan oedd p <0.05 ar gyfer yr holl brawf ystadegol. Результаты считались значимы при p <0,05 для всех статистических тестов. Ystyriwyd bod y canlyniadau'n arwyddocaol ar p <0.05 ar gyfer pob prawf ystadegol.当 所有 统计 检验 的 p <0.05 时 ， 结果 被 认为 是 显着 的。。当 所有 统计 检验 的 p <0.05 时 ， 结果 被 认为 是 显着 的。。 Результаты считались значимы при p <0,05 для всех статистических тестов. Ystyriwyd bod y canlyniadau'n arwyddocaol ar p <0.05 ar gyfer pob prawf ystadegol.
Mae Ffigur 2 yn dangos y llinell amser arbrofol (Ffigur 2A) a dosbarthiad amledd yr holl lygod mawr sy'n destun difodiant (Ffigur 2B). Roedd llygod mawr yn y grwpiau difodiant da a gwael yn amrywio'n sylweddol yn y sgoriau galw difodiant a gyfrifwyd hyn (U = 0, p <0.001) (Ffig. 2 C). Roedd llygod mawr yn y grwpiau difodiant da a gwael yn amrywio'n sylweddol yn y sgoriau galw difodiant a gyfrifwyd hyn (U = 0, p <0.001) (Ffig. 2 C). Крысы в ​​группах с хорошим и плохим угашение значителнно различалher пOut 1 эOack рack р р рack рarch рarch Roedd llygod mawr yn y grwpiau difodiant da a gwael yn amrywio'n sylweddol yn y cyfraddau galw difodiant a gyfrifwyd hyn (U = 0, p <0.001) (Ffigur 2C).在 这些 计算 的 灭绝 回忆 分数 中 ， 良好 良好 和 不良 灭绝 组 中 的 大鼠 存在 显着 差异 （（u = 0 ， p <0.001） （图 2c）。。 U = 0 ， p <0.001） （图 2c ， В этих расчитанных показателях припоминан d dd dd dd dd dd dd dd ddêr 5 к г г х х х х х х х хоро п 0 х хOr хOs хOs пOs пOr. Yn y cyfraddau galw difodiant hyn a gyfrifwyd, roedd llygod mawr yn y grwpiau difodiant da a gwael yn amrywio'n sylweddol (u = 0, p <0.001) (Ffigur 2C).Nid oedd gwahaniaeth arwyddocaol yn yr amser rhewi rhwng grwpiau â difodiant da, difodiant gwael, a galw yn ôl yn ôl yn ystod cyfnod sylfaenol y sesiwn atgyrch cyflyredig ofn (x2 (2) = 2.746, p = 0.253) (Ffigur 2D).Yn ogystal, yn ystod cyflwyniad tôn gyntaf yr atgyrch cyflyredig ofn, nid oedd gwahaniaeth arwyddocaol yn yr amser rhewi rhwng grwpiau â difodiant da, difodiant gwael a galw yn ôl ofn (x2 (2) = 1.107, p = 0.575), fel yn ogystal ag yn ystod ofn yn ystod yr ail arlliwiau.Yn ystod y sesiwn gyflyru, roedd gwahaniaeth sylweddol yn yr amser rhewi rhwng y grwpiau â difodiant da, difodiant gwael, a galw i gof ofn (x2 (2) = 2.214, p = 0.331) (Ffigur 2D).Nid oedd gwahaniaeth arwyddocaol hefyd yn yr amser pylu rhwng grwpiau difodiant da a gwael yn ystod y cyfnod hyfforddi difodiant sylfaenol (U = 45.00, p = 0.799) (Ffigur 2D). Nesaf, roedd prif effaith sylweddol bloc prawf (5 tôn y bloc) ar yr amser a dreuliwyd yn rhewi yn ystod y sesiwn hyfforddi difodiant (F (2.884, 54.80) = 8.331, p <0.001), gan nodi bod dysgu difodiant wedi digwydd (Ffig. 2D ). Nesaf, roedd prif effaith sylweddol bloc prawf (5 tôn y bloc) ar yr amser a dreuliwyd yn rhewi yn ystod y sesiwn hyfforddi difodiant (F (2.884, 54.80) = 8.331, p <0.001), gan nodi bod dysgu difodiant wedi digwydd (Ffig. 2D ). Затем наблюдался значительный основной эффект пробного блока (5 тонов на блок) на время, затрачиваемое на замирание во время тренировки угашения (F (2,884, 54,80) = 8,331, p <0,001), что указывает на то, что обучение угашению происходило ( рис. 2d). Yna cafwyd prif effaith sylweddol y bloc prawf (5 tôn y bloc) ar yr amser a gymerwyd i rewi yn ystod hyfforddiant difodiant (F (2.884, 54.80) = 8.331, p <0.001), gan nodi bod dysgu difodiant yn digwydd (Ffig (Ffig . 2d). ).接下来 ， 在 消退 训练 期间 ， ， （（每 块 5 音） 对 冻结 时间 有 显着 显着 的 主 效应 （（F （2.884，54.80） = 8.331 ， p <0.001）） ， ， 表明 发生 了 学习 学习 （（（（（（（（（ 。接下来 ， 在 消退 训练 期间 ， ， （（每 块 5 音） 对 冻结 时间 有 显着 显着 的 主 效应 （（F （2.884，54.80） = 8.331 ， p <0.001）） ， ， 表明 发生 了 学习 学习 （（（（（（（（（ 。 Затем, во время обучения угашению, пробные блоки (5 тонов на блок) оказали значительное основное влияние на время замирания (F (2,884, 54,80) = 8,331, p <0,001), что указывает на то, что обучение угашению происходило (рис . 2d). Yna, yn ystod dysgu difodiant, cafodd blociau treial (5 tôn y bloc) brif effaith sylweddol ar amser pylu (F (2.884, 54.80) = 8.331, p <0.001), gan nodi bod dysgu difodiant yn digwydd (Ffig. .2d) .Fodd bynnag, ni chafodd y grŵp difodiant (F (1, 19) = 3.091, p = 0.095) unrhyw effaith sylweddol ar yr amser pylu trwy gydol y cyfnod hyfforddi difodiant, ac nid oedd unrhyw ryngweithio rhwng y bloc prawf a'r grŵp difodiant (F (4 , 19)).76) = 1.890, p = 0.121) (Ffig. 2D). Yn ystod y sesiwn brofi, roedd gwahaniaeth sylweddol ymhlith y difodiant da, difodiant gwael, a grwpiau atgofion ofn mewn amser a dreuliwyd yn rhewi yn ystod y cyfnod sylfaenol (x2 (2) = 8.569, p = 0.014) fel bod y grŵp dwyn i gof ofn yn rhewi'n sylweddol Mwy na'r grŵp difodiant da (cymedr rheng diff. = 10.57, p = 0.017), ond nid y grŵp difodiant gwael (cymedr rheng diff. = - 3.714, p> 0.999) (Ffig. 2D). Yn ystod y sesiwn brofi, roedd gwahaniaeth sylweddol ymhlith y difodiant da, difodiant gwael, a grwpiau atgofion ofn mewn amser a dreuliwyd yn rhewi yn ystod y cyfnod sylfaenol (x2 (2) = 8.569, p = 0.014) fel bod y grŵp dwyn i gof ofn yn rhewi'n sylweddol Mwy na'r grŵp difodiant da (cymedr rheng diff. = 10.57, p = 0.017), ond nid y grŵp difodiant gwael (cymedr rheng diff. = - 3.714, p> 0.999) (Ffig. 2D).Yn ystod y sesiwn brofi, roedd gwahaniaeth sylweddol rhwng y difodiant da, difodiant gwael, a grwpiau atgofion ofn yn yr amser a dreuliwyd yn rhewi yn ystod y cyfnod sylfaenol (x2 (2) = 8.569, p = 0.014), fel bod y grŵp dwyn i gof ofn wedi rhewi yn sylweddol. yn fwy nag yn y grŵp difodiant da (gwahaniaeth rheng cymedrig = 10.57, p = 0.017) ond nid yn y grŵp difodiant gwael (gwahaniaeth rheng cymedrig = −3.714, p> 0.999) (Ffigur 2D).在 测试 期间 ， 良好 消退组 、 不良 消 退组 和 恐惧 恐惧 回忆组 在 基线期 冻结 时间 方面 存在 显着 差异 （（（x2 (2) = 8.569 ， p = 0.014） ， ， 因此 因此 恐惧 恐惧 回忆组 冻结 显着 超过 良好 的 组 组 组 组 组 组 组 组 组 良好 良好 冻结 冻结 冻结 冻结 冻结 冻结 冻结 冻结 冻结 冻结 冻结 冻结 冻结 回忆组 回忆组 回忆组 回忆组 回忆组 回忆组 回忆组 回忆组 回忆组 回忆组 回忆组 回忆组 回忆组 回忆组 回忆组 回忆组 回忆组 回忆组 回忆组 回忆组 回忆组 回忆组 回忆组 回忆组 回忆组 回忆组 回忆组 回忆组 回忆组 回忆组 回忆组 回忆组 回忆组 回忆组 回忆组 回忆组 回忆组 回忆组 回忆组. （平均 秩差 = 10.57 ， p = 0.017） ， 但 不 是 差 的 灭绝 组 （（平均 秩差 = - 3.714 ， p> 0.999） （图 图 2d））。在 测试 期间 ， 良好 消退组 、 消 退组 和 恐惧 在 基线期 基线期 冻结 时间 方面 存在 显着 （（（（x2 (2) = 8.569 ， p = 0.014） ， ， 恐惧 回忆组 回忆组 冻结 冻结 显着 显着 良好 的 组 组 组 组 组 组 组组 组 组 （平均 秩差 = 10.57 ， p = 0.017） ， 但 不 是 差绝组 （（平均 秩差 = - 3.714 ， p> 0.999） （图 2d））。 Yn ystod y cyfnod profi, roedd gwahaniaeth sylweddol rhwng y grŵp difodiant da, y grŵp difodiant gwael, a'r grŵp atgofion ofn o ran amser rhewi ar y llinell sylfaen (x2 (2) = 8.569, p = 0.014), felly mae'r ofn yn cofio Mae'r grŵp yn rhewi'n sylweddol amlach na'r grŵp â difodiant da (gwahaniaeth rheng cymedrig = 10.57, p = 0.017) ond nid y grŵp â difodiant gwael (gwahaniaeth rheng cymedrig = -3.714, p> 0.999) (Ffigur 2D).Roedd gan y grŵp difodiant da, y grŵp difodiant gwael, a'r Grŵp Dwyn i gof hefyd amseroedd pylu sylweddol wahanol yn ystod cyflwyniad tôn y sesiwn brawf (x2 (2) = 14.93, p = 0.001), felly roedd gan y grŵp difodiant da gryn dipyn yn llai amser.Amser rhewi nag yn y grŵp difodiant gwan (gwahaniaeth rheng cymedrig = 9.286, p = 0.044) a'r grŵp cof ofn (gwahaniaeth rheng cymedrig = 13.86, p = 0.001) (Ffig. 2D).
Gwahaniaethau unigol mewn atgof o ddifodiant.(A) Amlinelliad o weithdrefnau llawfeddygol ac ymddygiadol.(B) Dosbarthiad amledd sy'n dangos gwahaniaethau unigol mewn sgoriau cof diflannu.(C) Mae tystiolaeth bod grwpiau a ddyluniwyd yn seiliedig ar sgoriau galw difodiant wedi'u cyfrifo yn cynrychioli dau ffenoteip gwahanol.(Ch) Canran gymedrig y llygod mawr amser yn rhewi ar gyfer difodiant gwael, difodiant da, a galw yn ôl ofn mewn 30 eiliad o gelloedd sesiwn atgyrch ofn cyflyredig, yn arlliwiau 20, 30 s, wedi cwympo i 5 bloc yn ystod y sesiwn ddysgu difodiant (4 tôn) .pob un), ac mewn pedair arlliw mewn sesiynau o atgofion o bylu ac atgofion o ofn.Mae bariau gwall yn cynrychioli gwyriad safonol y cymedr. *p <0.05, ** p <0.01, *** p <0.001, **** p <0.0001. *p <0.05, ** p <0.01, *** p <0.001, **** p <0.0001. *р <0,05, ** р <0,01, *** р <0,001, **** р <0,0001. *p <0.05, ** p <0.01, *** p <0.001, **** p <0.0001. *p <0.05 ， ** p <0.01 ， *** p <0.001 ， **** p <0.0001。 *p <0.05 ， ** p <0.01 ， *** p <0.001 ， **** p <0.0001。 *р <0,05, ** р <0,01, *** р <0,001, **** р <0,0001. *p <0.05, ** p <0.01, *** p <0.001, **** p <0.0001.
Chwistrellwyd dangosydd ôl-dynnu i'r IL (Ffig. 3 A) a phenderfynwyd ar nifer y celloedd GFP+ ar hyd echel anterior-posterior y rhanbarth o ddiddordeb (Ffig. 3b-f).Roedd gwahaniaeth sylweddol yn nifer y celloedd GFP+ rhwng PVT anterior, canol a posterior (x2 (2) = 8.200, p = 0.017), felly dangosodd MPVT lawer mwy o gelloedd GFP+ nag APVT (rheng gymedrig) diff.= 18.37, p = 0.035) a ppvt (cymedr rheng diff. = 17.71, p = 0.045) (Ffig. 3 C).Er na chanfu sawl anifail unrhyw gelloedd GFP+ yn PCLA ac felly ni allent fapio gweithgaredd yn y rhanbarth hwn, nid oedd gwahaniaeth arwyddocaol rhwng CLA anterior, canol a posterior (x2 (2) = 5.596, p = 0.061).Nifer y celloedd GFP+ (Ffigur 3D).Yna, ers i rai celloedd GFP+ gael eu darganfod yn Abla neu AVHPC mewn sawl llygoden fawr, dim ond canol a chefn yr ardaloedd hyn a ddadansoddwyd.Roedd y BLA canol a posterior (u = 393, p = 0.009) yn amrywio'n sylweddol yn nifer y celloedd GFP+, felly dangosodd PBLA fwy o amcanestyniadau IL na MBLA (Ffigur 3E).Yn yr un modd, roedd gwahaniaeth sylweddol rhwng VHPCs canol a posterior, felly dangosodd PVHPCs fwy o amcanestyniadau IL na MVHPCs (U = 403.5, p = 0.014) (Ffigur 3F).Mae Ffigur 3G yn ddelwedd ragorol sy'n dangos FOS, AAVRG-GFP, a chelloedd wedi'u labelu'n ddwbl.
Meintioli il afferents yn rhanbarth diddordeb cyfan yr ymennydd.(A) Cynrychiolaeth sgematig o ddosbarthiad AAVRG-CAG-GFP yn Rat IL cyfan.(B) Delweddau cynrychioliadol o farcwyr ôl -dynnu mewn gwahanol leoliadau anteroposterior yn rhanbarth diddordeb yr ymennydd.Meintioli labelu yn ôl ar hyd yr echel anteroposterior (C) thalamws paraventricular, (D) clavicle, (e) tonsil basolateral, ac (f) hipocampws fentrol.(G) Delweddau cynrychioliadol yn dangos labelu AAVRG yn ôl, labelu FOS, a labelu AAVRG dwbl a FOS yn APVT.Mae bariau gwall yn cynrychioli gwyriad safonol y cymedr. *p <0.05, ** p <0.01. *p <0.05, ** p <0.01. *р <0,05, ** р <0,01. *p <0.05, ** p <0.01. *p <0.05 ， ** p <0.01。 *p <0.05 ， ** p <0.01。 *р <0,05, ** р <0,01. *p <0.05, ** p <0.01.Bar graddfa 100 µm.Atgynhyrchir y map ymennydd parth cyhoeddus ym mhanel A o Swanson (2004) Map yr Ymennydd: Strwythur yr Ymennydd Rat, 3ydd Argraffiad, wedi'i drwyddedu o dan drwydded ryngwladol Creative Commons Attribution-Noncommons 4.0 (https://creativecommons.org/licenses/by-NC )./4.0/) Ar gael i'w lawrlwytho yn https://larrywswanson.com.
Dadansoddwyd gweithgaredd FOS byd-eang ac IL-benodol yn APVT, MPVT a PPVT ym mhob llygod mawr.Nid oedd gwahaniaeth arwyddocaol rhwng difodiant da, difodiant gwael, galw ofn, a grwpiau celloedd cartref mewn mynegiant FOS yn APVT (x2 (3) = 3.888, p = 0.274) (Ffig. 4 A), ac nid oedd cydberthynas sylweddol rhwng FOS Yn APVT rhwng mynegiant a galw difodiant (Rs = 0.092, p = 0.691) (Ffigur 4B) neu rhwng mynegiant FOS mewn afferents APVT IL a galw difodiant yn ôl (Rs = 0.143, p = 0.537) (Ffigur 4D).Fodd bynnag, mewn afferents APVT IL, roedd mynegiant FOS yn amrywio'n sylweddol rhwng difodiant da, difodiant gwael, galw ofn, a grwpiau celloedd cartref (x2 (3) = 15.05, p = 0.002), felly dangosodd y grŵp dwyn i gof ofn ddifodiant cymharol dda.atchweliad (gwahaniaeth rheng cymedrig = 11.54, p = 0.003), atchweliad gwael (gwahaniaeth rheng cymedrig = 10.57, p = 0.034), a chell gartref (gwahaniaeth rheng cymedrig = 12.79, p = 0.005) grwpiau (Ffig. 4 C).Ymhellach, nid oedd gwahaniaeth arwyddocaol rhwng difodiant da, difodiant gwael, galw ofn, a grwpiau celloedd cartref ar gyfer mynegiant FOS yn MPVT (x2 (3) = 2.272, p = 0.518) (Ffig. 4E) ac ar gyfer mynegiant FOS yn MPVT..Cydberthynas sylweddol â galw difodiant (Rs = 0.168 p = 0.468) (Ffigur 4F).Er bod gwahaniaeth sylweddol rhwng y grwpiau da, drwg, ofn, a grwpiau celloedd cartref mewn mynegiant FOS mewn celloedd MPVT afferent IL (x2 (3) = 9.252, p = 0.026), ni ddatgelodd cymhariaeth post hoc unrhyw neu ddau.Gwahaniaethau sylweddol rhwng grwpiau (Ffigur 4G).At hynny, nid oedd unrhyw gydberthynas sylweddol rhwng mynegiant FOS mewn celloedd MPVT IL-afferent a galw difodiant (Rs = 0.174, p = 0.450) (Ffigur 4H). Nesaf, roedd gwahaniaeth sylweddol ymhlith y difodiant da, difodiant gwael, galw ofn, a grwpiau cawell cartref mewn mynegiant FOS yn y PPVT (x2 (3) = 13.89, p = 0.003), fel bod y grŵp difodiant da (rheng gymedrig Diff. = 14.96, p = 0.010), ond nid y difodiant gwael (cymedr rheng diff. = 12.86, p = 0.113) neu grŵp galw ofn (cymedr rheng diff. = 2.571, p> 0.999), arddangos mwy o fynegiant fos na'r Grŵp Cage Cartref (Ffig. 4i). Nesaf, roedd gwahaniaeth sylweddol ymhlith y difodiant da, difodiant gwael, galw ofn, a grwpiau cawell cartref mewn mynegiant FOS yn y PPVT (x2 (3) = 13.89, p = 0.003), fel bod y grŵp difodiant da (rheng gymedrig Diff. = 14.96, p = 0.010), ond nid y difodiant gwael (cymedr rheng diff. = 12.86, p = 0.113) neu grŵp galw ofn (cymedr rheng diff. = 2.571, p> 0.999), arddangos mwy o fynegiant fos na'r Grŵp Cage Cartref (Ffig. 4i). Далее, наблюдалась значительная разница между группами с хорошим угасанием, плохим угашением, отзывом страха и домашней клеткой в ​​экспрессии Fos в pPVT (X2 (3) = 13,89, p = 0,003), так что группа с хорошим угашением (средний ранг Diff. = 14,96, p = 0,010), но не в группе плохого угашения (средняя ранговая разница = 12,86, p = 0,113) или группы воспоминаний о страхе (средняя ранговая разница = 2,571, p > 0,999), демонстрировалась более ыраженнная экспресия fos, чем г группе группа домашних кл клеток (рис. 4i). Ymhellach, roedd gwahaniaeth sylweddol rhwng difodiant da, difodiant gwael, galw ofn, a grwpiau celloedd cartref mewn mynegiant FOS yn PPVT (x2 (3) = 13.89, p = 0.003), fel bod y grŵp difodiant da (cymedr rheng diff. = 14.96, p = 0.010), ond nid yn y grŵp difodiant gwael (gwahaniaeth rheng cymedrig = 12.86, p = 0.113) neu'r grŵp cof ofn (gwahaniaeth rheng cymedrig = 2.571, p> 0.999), yn dangos mynegiant FOS mwy amlwg nag yn y grŵp celloedd cartref (Ffigur 4i).其次 ， ppvt 中 fos 表达 好 消 、 差消 、 恐惧 和 家笼组 之间 存在 存在 显着 （（x2 （3） = 13.89 ， p = 0.003） 使得 消组 消组 （（（（cymedrig rheng difff.= 14.96, p = 0.010) ， 但 不 是 较 差 差 的 消退 (cymedr rheng diff. = 12.86, p = 0.113) 或 恐惧 回忆组 (cymedrig rheng diff. = 2.571, p> 0.999) ， 比 比 家庭 笼组 笼组 （图 4i ）。= 14.96, p = 0.010) ， 但 不 是 较 差 的 的 消退 (cymedr rheng diff. = 12.86, p = 0.113)）。。Yn ail, roedd gwahaniaethau sylweddol mewn mynegiant FOS yn PPVT rhwng y grwpiau da, drwg, atgof ofn a chelloedd cartref (x2 (3) = 13.89, p = 0.003), gan wneud y grŵp cymeriant da (gwahaniaeth rheng cymedrig = 14.96)., p = 0,010), но не хуже по угашению (средняя разница рангов = 12,86, p = 0,113) или группе отзыва страха (средняя разница рангов = 2,571, p > 0,999), чем в группе домашней клетки (рис. 4I) . ..Fodd bynnag, nid oedd unrhyw gydberthynas sylweddol rhwng mynegiant FOS PPVT a galw difodiant (Rs = 0.051, p = 0.825) (Ffigur 4J).Yn olaf, roedd gwahaniaeth sylweddol mewn mynegiant FOS mewn afferents ppvt il rhwng grwpiau â difodiant da, difodiant gwael, atgofion ofn, ac mewn celloedd cartref (x2 (3) = 12.34 p = 0.006), mor dda mynegiant fos yn IL- oedd oedd yn IL- oedd yn waeth nag yn y grwpiau difodiant (gwahaniaeth rheng cymedrig = 12.54, p = 0.014) ac yn y gell gartref (gwahaniaeth rheng cymedrig = 12.89, p = 0.049) (Ffig. 4K) ac yn cydberthyn yn sylweddol ag afferents IL o fewn PPVT rhwng actifadu ac actifadu ac actifadu ac actifadu ac afferents o fewn PPVT a Dirymu difodiant, roedd gwell dwyn i gof yn gysylltiedig â mwy o actifadu'r afferents IL hyn (Rs = -0.438, p = 0.047) (Ffigur 4L).
Cynyddwyd gweithgaredd FOS yn afferents IL y thalamws paraventricular posterior (PVT) mewn llygod mawr, a ddangosodd atchweliad da.(A) Nid oedd unrhyw wahaniaethau arwyddocaol rhwng grwpiau mewn mynegiant FOS yn APVT.(B) Nid oedd unrhyw gydberthynas sylweddol rhwng mynegiant FOS a galw difodiant yn APVT.(C) Dangosodd y grŵp Fear Dwyn i gof gynyddu mynegiant FOS mewn afferents IL o'i gymharu â phob grŵp arall.(Ch) Nid oedd unrhyw gydberthynas sylweddol rhwng mynegiant FOS mewn afferents IL a galw difodiant yn APVT.(E) Nid oedd unrhyw wahaniaethau rhyng -grŵp sylweddol mewn mynegiant FOS yn MPVT.(Dd) Nid oedd unrhyw gydberthynas sylweddol rhwng mynegiant FOS a chof difodiant yn MPVT.(G) Nid oedd mynegiant FOS mewn celloedd IL afferent yn MPVT yn amrywio'n sylweddol rhwng grwpiau.(H) Nid oedd unrhyw gydberthynas sylweddol rhwng mynegiant FOS mewn afferents IL a galw difodiant yn MPVT.(I) Dangosodd grŵp sydd wedi diflannu yn dda, ond dim grŵp arall, fwy o weithgaredd FOS yn PPVT o'i gymharu â'r grŵp cawell cartref.(J) Nid oedd unrhyw gydberthynas sylweddol rhwng mynegiant FOS a galw difodiant yn PPVT.(K) Dangosodd y grŵp difodiant da fynegiant FOS cynyddol mewn celloedd afferent IL o'i gymharu â'r grŵp difodiant gwan a'r grŵp celloedd cartref.(H) Mae cydberthynas sylweddol rhwng mynegiant FOS mewn afferents IL a galw difodiant, felly mae galw difodiant da yn gysylltiedig â mwy o fynegiant FOS mewn afferents IL.Mae bariau gwall yn cynrychioli gwyriad safonol y cymedr. *p <0.05, ** p <0.01. *p <0.05, ** p <0.01. *р <0,05, ** р <0,01. *p <0.05, ** p <0.01. *p <0.05 ， ** p <0.01。 *p <0.05 ， ** p <0.01。 *р <0,05, ** р <0,01. *p <0.05, ** p <0.01.
Yna dadansoddwyd gweithgaredd FOS taflunio byd-eang ac IL yn ACLA a MCLA o lygod mawr ym mhob grŵp. Roedd gwahaniaeth sylweddol ymhlith y difodiant da, difodiant gwael, dwyn i gof ofn, a grwpiau cawell cartref mewn mynegiant FOS yn yr ACLA (x2 (3) = 8.455, p = 0.036) fel bod y grŵp atgofion ofn (cymedr rheng diff. = = = 14.50, p = 0.049), ond nid yw'r naill na'r llall (cymedr rheng diff. = 10.21, p = 0.373) na difodiant da (cymedr rheng diff. = 4.607, p> 0.999) grwpiau, yn arddangos mwy o fynegiant FOS na'r grŵp cawell cartref ( Ffig. 5a). Roedd gwahaniaeth sylweddol ymhlith y difodiant da, difodiant gwael, dwyn i gof ofn, a grwpiau cawell cartref mewn mynegiant FOS yn yr ACLA (x2 (3) = 8.455, p = 0.036) fel bod y grŵp atgofion ofn (cymedr rheng diff. = = = 14.50, p = 0.049), ond nid yw'r naill na'r llall (cymedr rheng diff. = 10.21, p = 0.373) na difodiant da (cymedr rheng diff. = 4.607, p> 0.999) grwpiau, yn arddangos mwy o fynegiant FOS na'r grŵp cawell cartref ( Ffig. 5a). Между группами с хорошим угашением, плохим угашением, припоминанием страха и домашними клетками наблюдалась значительная разница в экспрессии Fos в aCLA (X2 (3) = 8,455, p = 0,036), так что группа припоминания страха (среднее ранговое различие = 14,50, p = 0,049), но ни плохая (средняя ранговая разница = 10,21, p = 0,373), ни группа с хорошим вымиранием (средняя ранговая разница = 4,607, p > 0,999) не демонстрировали большей экспрессии Fos, чем группа в домашней клетке ( Рис . 5а). Roedd gwahaniaeth sylweddol yn y mynegiant ACLA FOS rhwng y difodiant da, difodiant gwael, grwpiau dwyn i gof ofn a chelloedd cartref (x2 (3) = 8.455, p = 0.036), fel bod y grŵp galw ofn (gwahaniaeth rheng cymedrig = 14.50, p = 0.049), ond ni ddangosodd y naill na'r llall (y gwahaniaeth rheng cymedrig = 10.21, p = 0.373) na'r grŵp difodiant da (gwahaniaeth rheng cymedrig = 4.607, p> 0.999) fwy o fynegiant FOS na'r grŵp celloedd cartref (Ffig. .5a) . aCLA 中Fos 表达的良好消退、消退差、恐惧回忆和家庭笼组之间存在显着差异(X2 (3) = 8.455, p = 0.036)，因此恐惧回忆组(Mean Rank Diff. = 14.50，p = 0.049） ， 但 无论是 差 （（平均 秩差 = 10.21 ， p = 0.373） 还是 良好 灭绝 （（平均 秩差 = 4.607 ， p> 0.999） 组 ， ， 都 都 显示 出 出 比 比 家庭 家庭 笼组 更 更 的 的 图 图 图 图 图 图 图 图 图 图 图 图 图 图 图 图 图 图 图 图 图 图。 Acla 中 fos 表达 的 消退 、 消退差 、 回忆 和 家庭 家庭 笼组 之间 存在 显着 差异 差异 差异 差异 差异 差异 (x2 (3) = 8.455, p = 0.036) ， 因此 因此 恐惧 回忆组 回忆组 回忆组 回忆组 回忆组 回忆组Rheng diff. = 14.50 ， p = p = p = p = p = 14. 0.049） ， 但 无论是 差 平均 秩差 秩差 秩差 = 10.21 ， p = 0.373） 良好 灭绝 （（平均 平均 秩差 秩差 = 4.607 ， p> 0.999） 组 都 出 比 家庭 笼组 更 多 的 表达 图 图 图 图 5a)。 Была значительная разница между группами с хорошим угашением, плохим угашением, отзывом страха и домашней клеткой по экспрессии Fos в aCLA (X2(3) = 8,455, p = 0,036), поэтому группа отзыва страха (среднее ранговое различие = 14,50) , p = 0,049), но группы с плохим (средняя разница рангов = 10,21, p = 0,373) и с хорошим вымиранием (средняя разница рангов = 4,607, p > 0,999) показали более высокую экспрессию Fos, чем группа с домашней клеткой (рис. 5a). Roedd gwahaniaeth sylweddol rhwng difodiant da, difodiant gwael, galw i gof ofn a grwpiau celloedd cartref yn mynegiant ACLA FOS (x2 (3) = 8.455, p = 0.036), felly grŵp galw at gofio (gwahaniaeth rheng cymedrig = 14.50), p = 0.049 ), ond dangosodd grwpiau â gwael (gwahaniaeth rheng cymedrig = 10.21, p = 0.373) a difodiant da (gwahaniaeth rheng cymedrig = 4.607, p> 0.999) fynegiant Fos uwch na'r grŵp celloedd cartref (Ffig. 5a). .Nid oedd unrhyw gydberthynas sylweddol rhwng mynegiant FOS byd -eang yn (Rs = 0.036, p = 0.876) (Ffigur 5B) neu fynegiant FOS mewn celloedd afferent IL acla (Rs = -0.282, p = 0.215) a galw difodiant yn ôl (Ffigur 5B)..5d), nid oedd gwahaniaeth arwyddocaol chwaith rhwng difodiant da, difodiant gwael, galw ofn, a grwpiau celloedd cartref mewn mynegiant FOS mewn afferents acla il (x2 (3) = 6.722, p = 0.081) (Ffigur 5C)..). Nesaf, roedd gwahaniaeth sylweddol ymhlith y difodiant da, difodiant gwael, galw ofn, a grwpiau cawell cartref mewn mynegiant FOS yn y MCLA (x2 (3) = 10.12, p = 0.018) fel bod y grŵp difodiant da (rheng gymedrig diff . = 12.93, p = 0.038), ond nid yw'r difodiant gwael (rheng gymedrig diff. = 5.143, p> 0.999) na grwpiau galw atgofion (cymedr rheng diff. = 14.00, p = 0.063) yn dangos llawer mwy o fynegiant FOS yn y McLa yn gymharol â'r grŵp cawell cartref (Ffig. 5E). Nesaf, roedd gwahaniaeth sylweddol ymhlith y difodiant da, difodiant gwael, galw ofn, a grwpiau cawell cartref mewn mynegiant FOS yn y MCLA (x2 (3) = 10.12, p = 0.018) fel bod y grŵp difodiant da (rheng gymedrig diff . = 12.93, p = 0.038), ond nid yw'r difodiant gwael (rheng gymedrig diff. = 5.143, p> 0.999) na grwpiau galw atgofion (cymedr rheng diff. = 14.00, p = 0.063) yn dangos llawer mwy o fynegiant FOS yn y McLa yn gymharol â'r grŵp cawell cartref (Ffig. 5E). Затем наблюдалась значительная разница между группами с хорошим угашением, плохим угашением, воспоминаниями о страхе и домашней клеткой в ​​экспрессии Fos в mCLA (X2 (3) = 10,12, p = 0,018), так что группа с хорошим угашением (средняя разница рангов . = 12,93, p = 0,038), но ни группы плохого угашения (средняя ранговая разница = 5,143, p > 0,999), ни группы отзыва страха (средняя ранговая разница = 14,00, p = 0,063) не показали значительно большей экспрессии fos в mcla. Yna roedd gwahaniaeth sylweddol rhwng difodiant da, difodiant gwael, atgofion ofn a grwpiau celloedd cartref yn mynegiant MCLA FOS (x2 (3) = 10.12, p = 0.018), fel bod y grŵp difodiant da (gwahaniaeth gwahaniaeth cymedrig = 12.93, p = 0.038), ond ni ddangosodd y grwpiau difodiant gwael (gwahaniaeth rheng cymedrig = 5.143, p> 0.999) na'r grwpiau galw ofn (gwahaniaeth rheng cymedrig = 14.00, p = 0.063) fynegiant FOS sylweddol fwy yn MCLA.o'i gymharu â'r grŵp cawell cartref (Ffigur 5E).接下来 ， 在 mcla 中 的 fos 表达 ， 良好 消退组 、 不良 消 退组 、 恐惧 回忆组 家庭 笼组 之间 显着 显着 差异 （x2 （3） = 10.12 ， p = 0.018） ， ， ， 良好 良好 （（（（（（（（ （（（Cymedr rheng diff.= 12.93, p = 0.038) ， 但 在 mcla 中 ， 弱消退 （平均 平均 秩差 = 5.143 ， p> 0.999） 和 恐惧 回忆组 （（平均 秩差 = 14.00 ， p = 0.063） 均 均 未 显示 出 多 的 表达 表达 表达 表达 表达 表达 表达 表达 表达 更 更 更 更 更 更 更 更 更 更 更 更 更 更 更 更 更 更 多相对于 家庭 笼组 （图 5e）。。 = 12.93, p = 0.038) ， 在 在 mcla 中 ， 弱消退 （平均 秩差 秩差 秩差 秩差 = 5.143 ， p> 0.999） 和 回忆组 （（平均 秩差 = 14.00 ， p = 0.063）） 未 显示 出 多 的 的fos 表达 表达 的 fos 表达 表达 的 fos 表达 相对于 家庭 笼组 （图 5e）。。 Далее, в экспрессии Fos в mCLA наблюдалась значительная разница между группой с хорошим угасанием, группой с плохим угасанием, группой с отзывом о страхе и группой с домашней клеткой (X2(3) = 10,12, p = 0,018), так, группа хорошего угашения (средняя разность рангов = 12,93, p = 0,038), но в mCLA ни слабое угасание (средняя разница рангов = 5,143, p > 0,999), ни группа отзыва страха (средняя разница рангов = 14,00, p = 0,999) = 0,063) показали лучшую экспресию много fos по сравнению с группой с домашней к кRи р рису helaeth). Ymhellach, roedd gwahaniaeth sylweddol mewn mynegiant FOS yn MCLA rhwng y grŵp difodiant da, y grŵp difodiant gwael, y grŵp adborth ofn, a'r grŵp celloedd cartref (x2 (3) = 10.12, p = 0.018), felly, y da difodiant (gwahaniaeth rheng cymedrig = 12.93, p = 0.038), ond mewn mcla nid yw difodiant gwan (gwahaniaeth rheng cymedrig = 5.143, p> 0.999) na grŵp galw atgofion (gwahaniaeth rheng cymedrig = 14.00, p = 0.999) = 0.999) = 0.063) yn dangos yn well Mynegiant aml -FOS o'i gymharu â'r grŵp celloedd cartref (Ffigur 5E).Fodd bynnag, mynegiant FOS byd -eang yn MCLA (Rs = 0.321, p = 0.156) (Ffig. 5F) neu mewn celloedd IL MCLA afferent (Rs = -0.121, p = 0.602) a galw i gof difodiant (Ffig. 5H), dim gwahaniaeth arwyddocaol rhwng Grwpiau â difodiant da, difodiant gwael, galw ofn atgof, a chell gartref ar gyfer mynegiant FOS mewn celloedd afferent IL MCLA (x2 (3) = 4.923, p = 0.178) (Ffigur 5G).
Codwyd gweithgaredd FOS yng nghanol y clawstrwm mewn llygod mawr gyda chof difodiant da.(A) Dangosodd y grŵp galw ofn, ond nid y grwpiau eraill, fwy o weithgaredd FOS o'i gymharu â'r grŵp celloedd cartref yn ACLA.(B) Nid oedd unrhyw gydberthynas sylweddol rhwng mynegiant FOS yn ACLA a galw difodiant.(C) Nid oedd mynegiant FOS mewn celloedd ACLA afferent IL yn amrywio'n sylweddol rhwng grwpiau.(Ch) Nid oedd unrhyw gydberthynas sylweddol rhwng mynegiant FOS mewn afferents IL a galw difodiant yn ACLA.(D) Dangosodd y grŵp sydd wedi diflannu yn dda, ond nid y grwpiau eraill, fwy o weithgaredd FOS yn MCLA o'i gymharu â'r grŵp celloedd cartref.(Dd) Nid oedd unrhyw gydberthynas sylweddol rhwng mynegiant FOS a galw difodiant yn MCLA.(G) Nid oedd mynegiant FOS mewn celloedd afferent IL MCLA yn amrywio'n sylweddol rhwng grwpiau.(H) Nid oedd unrhyw gydberthynas sylweddol rhwng mynegiant FOS mewn afferents IL a galw difodiant yn MCLA.Mae bariau gwall yn cynrychioli gwyriad safonol y cymedr. *p <0.05. *p <0.05. *р <0,05. *p <0.05. *p <0.05。 *p <0.05。 *р <0,05. *p <0.05.
Yna, dadansoddwyd gweithgaredd FOS taflunio byd-eang ac IL yn MBLA a PBLA ym mhob grŵp o lygod mawr.Nid oedd gwahaniaeth arwyddocaol rhwng difodiant da, difodiant gwael, galw ofn, a grwpiau celloedd cartref mewn mynegiant FOS yn MBLA (x2 (3) = 0.944, p = 0.815) (Ffigur 6A).Nid oedd gwahaniaeth arwyddocaol chwaith rhwng grwpiau ag atchweliad da, atchweliad gwael, galw ofn, a mynegiant FOS celloedd cartref mewn celloedd afferent IL MBLA (x2 (3) = 0.518, p = 0.915) (Ffigur 6C).Yn ogystal, nid oedd unrhyw gydberthynas sylweddol rhwng mynegiant FOS byd -eang yn MBLA (Rs = 0.126, p = 0.588) (Ffigur 6B) a mynegiant FOS mewn celloedd afferent IL MBLA (Rs = 0.200, p = 0.385) (rs = 0.200, p = 0.385).P = 0.385).Ffigur 6d) a galw difodiant.Nid oedd gwahaniaeth arwyddocaol chwaith mewn difodiant da, difodiant gwael, cof ofn, a grwpiau celloedd cartref mewn mynegiant FOS yn PBLA (x2 (3) = 4.246, p = 0.236) (Ffig. 6E), ac nid oedd gwahaniaeth arwyddocaol chwaith unrhyw wahaniaeth arwyddocaol yn PBLA da.Difodiant, difodiant gwael, galw ofn, a grwpiau celloedd cartref mewn mynegiant FOS mewn celloedd afferent IL (x2 (3) = 1.954, p = 0.582) (Ffigur 6G).Yn olaf, mynegiant FOS byd -eang yn PBLA (Rs = 0.070, p = 0.762) (Ffig. 6F) a mynegiant FOS mewn celloedd afferent PBLA IL (Rs = 0.122, p = 0.597) a galw difodiant yn ôl (Ffig. 6H).
Ni fapiwyd gwahaniaethau unigol mewn atgenhedlu difodiant i wahaniaethau mewn mynegiant FOS yn yr amygdala basolateral.(A) Nid oedd unrhyw wahaniaethau rhyng -grŵp sylweddol mewn mynegiant FOS yn MBLA.(B) Nid oedd unrhyw gydberthynas sylweddol rhwng mynegiant FOS a galw difodiant yn MBLA.(C) Nid oedd mynegiant FOS mewn celloedd afferent IL MBLA yn amrywio'n sylweddol rhwng grwpiau.(D) Nid oedd unrhyw gydberthynas sylweddol rhwng mynegiant FOS mewn celloedd afferent IL a galw difodiant yn MBLA.(E) Nid oedd unrhyw wahaniaethau rhyng -grŵp sylweddol mewn mynegiant FOS yn PBLA.(Dd) Nid oedd unrhyw gydberthynas sylweddol rhwng mynegiant FOS a galw difodiant yn PBLA.(G) Nid oedd mynegiant FOS mewn celloedd PBLA afferent IL yn amrywio'n sylweddol rhwng grwpiau.(H) Nid oedd unrhyw gydberthynas sylweddol rhwng mynegiant FOS mewn celloedd afferent IL a galw difodiant yn PBLA.Mae bariau gwall yn cynrychioli gwyriad safonol y cymedr.
Yn olaf, dadansoddwyd gweithgaredd FOS byd-eang ac IL-benodol yn MVHPC a PVHPC ym mhob llygod mawr. Roedd gwahaniaeth sylweddol ymhlith y difodiant da, difodiant gwael, galw ofn, a grwpiau cawell cartref mewn mynegiant FOS yn yr MVHPC (x2 (3) = 8.056, p = 0.045) fel bod y difodiant da (rheng gymedrig diff. = 13.29 , P = 0.031), ond nid oedd y naill na'r llall yn wael (cymedr rheng diff. = 6.857, p> 0.999) na galw galw yn ôl (cymedr rheng diff. = 8.000, p = 0.864) Dangosodd grwpiau fwy o fynegiant FOS na'r grŵp cawell cartref (Ffig. 7a). Roedd gwahaniaeth sylweddol ymhlith y difodiant da, difodiant gwael, galw ofn, a grwpiau cawell cartref mewn mynegiant FOS yn yr MVHPC (x2 (3) = 8.056, p = 0.045) fel bod y difodiant da (rheng gymedrig diff. = 13.29 , P = 0.031), ond nid oedd y naill na'r llall yn wael (cymedr rheng diff. = 6.857, p> 0.999) na galw galw yn ôl (cymedr rheng diff. = 8.000, p = 0.864) Dangosodd grwpiau fwy o fynegiant FOS na'r grŵp cawell cartref (Ffig. 7a). Между группами с хорошим угасанием, плохим угашением, отзывом страха и домашними клетками наблюдалась значительная разница в экспрессии Fos в mvHPC (X2 (3) = 8,056, p = 0,045), так что хорошее угасание (средняя ранговая разница = 13,29) , p = 0,031), но ни в группах с плохим угасанием (средняя ранговая разница = 6,857, p > 0,999), ни в группе с отзывом страха (средняя ранговая разница = 8,000, p = 0,864) экспрессия Fos была выше, чем в группе с домашней клеткой (рис. 7а). Roedd gwahaniaeth sylweddol yn y mynegiant FOS MVHPC rhwng grwpiau â difodiant da, difodiant gwael, galw ofn, a chelloedd cartref (x2 (3) = 8.056, p = 0.045), felly difodiant da (gwahaniaeth rheng cymedrig = 13.29), p = p = 0.031), ond nid oedd y naill na'r llall yn y grŵp difodiant gwael (gwahaniaeth rheng cymedrig = 6.857, p> 0.999) nac yn y grŵp galw ofn (gwahaniaeth rheng cymedrig = 8.000, p = 0.864) yn Fos Mynegiant yn uwch nag yn y grŵp cartref.cell (Ffig. 7a). MVHPC 中 FOS 表达 的 良好 消退 、 不良 不良 消退 、 恐惧 回忆 和 家庭 笼组 之间 存在 显着 显着 差异 （（（（（（（（（（（（（（（（（（（（（（（（（差异 差异 差异 差异 差异 差异 差异 差异 差异 差异 差异 差异 差异 差异 差异 差异 差异 差异 差异 差异 差异 差异 差异 差异 差异 差异 差异 差异 差异 差异 差异 显着 显着 显着 显着 显着 显着 显着 显着 显着 显着 显着 存在 存在 存在 存在 存在 存在 存在 之间 之间 之间 之间 笼组 笼组 笼组 笼组 笼组 笼组 笼组 家庭 家庭 家庭 家庭 家庭 家庭 家庭 家庭 家庭 笼组 之间 ，） ， 因此 良好 消退 平均 秩差 秩差 秩差））））））））））））））））. ） ， 但 无论是 弱消退 （（平均 秩差 = 6.857 ， p> 0.999） 还是 恐惧 回忆 （（平均 秩差 = 8.000 ， p = 0.864） 组都 显示 出 比 比 家庭 家庭 笼组 更 更 多 多 的 的 的 表达 （。。。。 MVHPC 中 FOS 表达 的 消退 、 不良 消退 消退 恐惧 回忆 和 家庭 笼组 之间 存在 显着 差异 （（（（（（（（（（（（（（（（（（（（（（（（（（（（（（（（（（（（（（（（（（（（（（（（（（（（（（（（（（（（（（（（（（（（（差异 差异 差异 差异 差异 差异 差异 差异 差异 差异 显着 显着 显着 显着 显着 存在 存在 存在 存在 存在 之间 之间 之间 笼组 笼组 笼组 家庭 家庭 家庭 家庭 和 和 和 和 家庭 笼组 ， ， 良好 （（平均 秩差 秩差）） p = 0.031） ， 但 无论是 弱消退 （平均 平均 秩差 秩差 = 6.857 ， p> 0.999） 还 是 恐惧 （（平均 秩差 秩差 = 8.000 ， p = 0.864） 组 都 出 出 家庭 家庭 笼组 笼组 多 的 的 的 的 表达 图 图 。。。。 ）））））））））））））））））））））））））））））））））））））））））） Имелась значительная разница между группами «хорошо», «плохо», «припоминание страха» и «домашняя клетка» для экспрессии Fos в mvHPC (X2(3) = 8,056, p = 0,045) и, следовательно, хорошая регрессия (средняя разница рангов = 13,29), p = 0,031), но группы со слабым угасанием (средняя разница рангов = 6,857, p > 0,999) и воспоминания о страхе (средняя разница рангов = 8,000, p = 0,864) показали более высокую экспрессию Fos, чем группа в домашней клетке (рис. 2). Roedd gwahaniaeth sylweddol rhwng y grwpiau da, drwg, ofn, a grwpiau celloedd cartref ar gyfer mynegiant FOS yn MVHPC (x2 (3) = 8.056, p = 0.045) ac felly atchweliad da (gwahaniaeth rheng cymedrig = 13.29), p = p = 0.031), ond dangosodd grwpiau â difodiant gwan (gwahaniaeth rheng cymedrig = 6.857, p> 0.999) ac atgofion ofn (gwahaniaeth rheng cymedrig = 8.000, p = 0.864) fynegiant FOS uwch na'r grŵp mewn cawell cartref (Ffig. 2).7a).Fodd bynnag, nid oedd gwahaniaeth arwyddocaol (x2 (3) = 4.893, p = 0.180) (Ffigur 7C).Yn ogystal, nid oedd unrhyw gydberthynas sylweddol rhwng mynegiant FOS byd -eang yn MVHPC (Rs = -0.233, p = 0.309) (Ffigur 7B) a mynegiant FOS mewn celloedd IL afferent MVHPC (Rs = 0.056, p = 0.810) (Ffigur 7D).ac adroddiad ar y diflaniad.Ymhellach, nid oedd gwahaniaeth arwyddocaol rhwng difodiant da, difodiant gwael, galw ofn, a grwpiau celloedd cartref mewn mynegiant FOS yn PVHPC (x2 (3) = 3.623, p = 0.353) (Ffigur 7E), ac nid oedd unrhyw wahaniaethau arwyddocaol.Gwahaniaeth mewn atchweliad da mynegiant FOS mewn celloedd IL afferent PVHPC, atchweliad gwael, cof ofn, a grwpiau celloedd cartref (x2 (3) = 3.871, p = 0.276) (Ffig. 7G).Yn olaf, nid oedd unrhyw gydberthynas sylweddol rhwng mynegiant FOS byd-eang PVHPC (Rs = −0.127, p = 0.584) (Ffigur 7F) a mynegiant FOS mewn celloedd PVHPC IL-afferent (Rs = 0.176, p = 0.447) a galw difodiant (Ffigur 7F (Ffigur 7F a galw ).7h).
Mae mynegiant FOS wedi'i ddyrchafu yn hipocampws fentrol llygod mawr, gan nodi difodiant cof da.(A) Dangosodd y grŵp sydd wedi diflannu yn dda, ond nid y grwpiau eraill, fynegiant cynyddol o FOS yn MVHPC o'i gymharu â'r grŵp celloedd cartref.(B) Nid oedd unrhyw gydberthynas sylweddol rhwng mynegiant FOS a galw difodiant yn MVPHC.(C) Nid oedd mynegiant FOS mewn celloedd IL afferent MVHPC yn amrywio'n sylweddol rhwng grwpiau.(Ch) Nid oedd unrhyw gydberthynas sylweddol rhwng mynegiant FOS mewn afferents IL a galw difodiant yn MVHPC.(E) Nid oedd unrhyw wahaniaethau arwyddocaol rhwng grwpiau mewn mynegiant FOS yn PVHPC.(Dd) Nid oedd unrhyw gydberthynas sylweddol rhwng mynegiant FOS a galw difodiant yn PVHPC.(G) Nid oedd mynegiant FOS mewn celloedd IL afferent PVHPC yn amrywio'n sylweddol rhwng grwpiau.(H) Nid oedd unrhyw gydberthynas sylweddol rhwng mynegiant FOS mewn afferents IL a galw difodiant yn PVHPC.Mae bariau gwall yn cynrychioli gwyriad safonol y cymedr. *p <0.05. *p <0.05. *р <0,05. *p <0.05. *p <0.05。 *p <0.05。 *р <0,05. *p <0.05.Dangosodd ein dadansoddiad sylfaenol ar gyfer pob rhanbarth gymhariaeth ar dair lefel ar hyd yr echel anteroposterior, er ein bod hefyd wedi dadansoddi pob rhanbarth a oedd yn cwympo ar hyd yr echel anteroposterior.Cyflwynir canlyniadau'r dadansoddiadau hyn yn Nhabl 1.
Yma gwnaethom brofi a fyddai gwahaniaethau unigol mewn galw difodiant yn cael eu hadlewyrchu mewn gwahanol batrymau gweithgaredd afferent yn y cortecs limbig isaf.I'r perwyl hwn, gwnaethom asesu gweithgaredd FOS mewn amcanestyniadau IL o'r thalamws paraventricular, clawstrum, tonsil basolateral, a hipocampws fentrol ar ôl ailchwarae difodiant.Mewn celloedd sy'n taflunio IL, gwelsom weithgaredd uwch yn rhanbarth posterior PVT mewn llygod mawr a oedd yn arddangos galw difodiant da yn ôl o gymharu â llygod mawr â difodiant gwael.Nid oedd unrhyw wahaniaethau mewn afferents IL o'r niwclews clavicular, hipocampws fentrol, neu tonsil basolateral.Yn ogystal â chelloedd sy'n taflunio IL, gwelwyd mwy o weithgaredd niwral mewn ardaloedd dethol o'r llygoden fawr clawstrwm a hipocampws fentrol gyda datrysiad da.Mae ein canlyniadau'n dangos bod cof difodiant llwyddiannus yn cael ei drefnu gan amcanestyniadau PVT penodol i IL a chelloedd nad ydynt yn dargedu yn y clawstrwm a'r hipocampws fentrol.
Gwelsom fod rhagfynegiad PVT IL yn weithredol mewn llygod mawr a oedd yn dangos galw difodiant da yn ôl, sy'n gyson ag astudiaeth ddiweddar yn dangos bod angen PVT ar gyfer galw difodiant.Ni ddefnyddiodd yr astudiaeth hon driniaethau isranbarth-benodol, ond dangosodd fod angen amcanestyniadau PVT ar yr amcanestyniadau amygdala canolog ac IL ochrol ar PVT i atgynhyrchu difodiant.Mae ein canlyniadau'n dangos, yn ychwanegol at y gadwyn IL-PVT-CEL, y gallai fod angen mynediad ôl-PVT i IL hefyd ar gyfer galw quench yn ôl.Felly, mae'n ymddangos bod cysylltiadau IL efferent ac afferent yn ymwneud ag atgynhyrchu difodiant.Cam nesaf pwysig yw penderfynu beth sy'n achosi i PPVT arwyddocâd difodiant ar lefel cylched niwral.Yn ychwanegol at y berthynas ag IL, mae astudiaethau olrhain dwythell blaenorol31,32 wedi dangos bod PPVT yn derbyn mewnbwn gan y llwyd periaqueductal fentrol (VPAG), sy'n gysylltiedig â dysgu difodiant33,34,35,36.Er nad yw rôl VPAG mewn galw difodiant wedi'i sefydlu, mae rhagfynegiad PPVT gan VPAG yn ymgeisydd deniadol oherwydd eu dwysedd a chyfranogiad y ddau ranbarth wrth gynhyrchu tystiolaeth flaenorol o ddifodiant ofn.
Agwedd bwysig arall ar ein canlyniadau PVT yw eu bod yn arbenigo ar hyd eu hechel anterior-posterior.Yn drawiadol, mae gweithgaredd niwronau'r amcanestyniad PVT yn IL yn cydberthyn â'r wladwriaeth ymddygiadol gyferbyn, fel bod gweithgaredd taflunio cyn-PVT yn IL yn gysylltiedig ag galw ofn atgof, tra bod amcanestyniad PPVT yn weithredol ar ôl diflannu dwyn i gof yn llwyddiannus (h.y., ofn).Nid yw'r heterogenedd swyddogaethol hwn yn y PVT yn syndod o ystyried gwaith blaenorol [a drafodwyd yn 37].Mae enghraifft drawiadol o ddosbarthiad swyddogaethol yn PVT wedi dod i'r amlwg yn ddiweddar mewn astudiaeth sydd wedi nodweddu priodweddau mathau penodol o gelloedd yn PVT.Mae'r astudiaeth hon yn dangos bod celloedd dopamin sy'n mynegi DRD2 yn cael eu mynegi'n bennaf yn PPVT, yn mewnosod y cortecs forelimb, ac yn ymateb i ysgogiadau aversive.Mynegir yr ail boblogaeth gell yn bennaf yn APVT ac mae'n nodi'r newid i gyflwr o gyffroad ffisiolegol isel ac yn mewnfudo cortecs yr aelodau isaf.Go brin bod ein canlyniadau'n ffitio i'r patrwm hwn, gan fod celloedd APVT sy'n taflunio IL yn weithredol yn ystod galw ofn, tra bod rhagamcanion PPVT yn weithredol ac mae anifeiliaid yn dangos lefelau isel o ofn.Mae o leiaf ddau esboniad posibl am yr anghysondeb ymddangosiadol.Yn gyntaf, nid yw'r mathau o gelloedd a nodwyd wedi'u lleoli yn unig mewn un safle anterior-posterior o'r TVV.Felly, gall celloedd PPVT sy'n taflunio IL gweithredol mewn llygod mawr sydd â chof difodiant da berthyn i ddosbarth o gelloedd sy'n fwy tebygol o gael eu canfod yn APVT a nodi trosglwyddiad i gyflwr cyffroi isel.Efallai y bydd yr un peth yn wir am gelloedd sy'n taflunio IL mewn APVT a actifadir ar ôl cof ofn.Yn ail, mae astudiaethau olrhain blaenorol wedi nodi presenoldeb PPVTs sy'n taflunio IL3, er ei bod yn ymddangos bod rhai yn deillio o gelloedd sy'n cynnwys DRD2, gall mathau eraill o gelloedd daflunio i IL a chael eu actifadu ar ôl atgynhyrchu quenching yn llwyddiannus.
Er mai nod yr astudiaeth hon oedd nodi gwahaniaethau rhwng llygod mawr sy'n arddangos gwahanol ffenoteipiau difodiant, datgelodd yr arbrofion hyn ddata newydd yn ymwneud â mecanweithiau cof ofn.Yn ddiddorol, gwelsom fwy o weithgaredd FOS yn y CLA anterior mewn llygod mawr â chof ofn.
Mae'r clavicle wedi'i leoli fel canolbwynt cyfathrebu cortical ac mae'n ymwneud â phrosesau sy'n amrywio o integreiddio synhwyraidd i sylw a chysgu40,41,42,43.Prin yw'r dystiolaeth ar sut mae'r clawstrwm yn gysylltiedig â chyflyru ofn neu fynegiant ofn, fodd bynnag, mae ymchwil gynharach wedi dangos bod mynegiant ofn cyd -destunol yn gysylltiedig â gweithgaredd FOS yn y clawstrwm.Adroddwyd yn ddiweddar bod atal rhagamcanion atresia i'r cortecs entorhinal yn ystod cyflyru ofn cyd-destunol yn amharu ar ffurfio cof tymor hir, er nad yw eu hangen am fynegiant ofn wedi'i brofi.Yn yr un astudiaeth, gwelwyd mwy o actifadu FOS pan oedd anifeiliaid yn agored i amgylchedd newydd o gymharu â llygod a oedd yn agored i amgylchedd cyfarwydd.Gyda hyn mewn golwg, gall yr actifadu CLA rydyn ni'n ei adrodd yma fod oherwydd dod i gysylltiad â'r camera newydd yn ystod profion, yn hytrach nag ofn dwyn i gof ei hun.Er mwyn nodweddu swyddogaeth cloeon mewn ofn a phrosesu sefyllfaol yn fwy cywir, dylai astudiaethau yn y dyfodol ddefnyddio trin clo wedi'i dargedu.
Er bod gwaith blaenorol wedi dangos bod PVT yn gysylltiedig â mynegiant cof ofn, 45,46,47 Ni wnaethom arsylwi unrhyw newid yng nghyfanswm mynegiant FOS mewn llygod mawr pan oeddent yn cofio ofn 48 awr ar ôl cyflyru.Gellir esbonio'r gwahaniaeth hwn gan sawl ffactor, gan gynnwys gwaith blaenorol yn profi ofn ciwiau arwahanol yn yr un cyd -destun y digwyddodd y cyflyru ynddo, ond yn ein arbrawf, gwnaed profion mewn ystafell newydd.Yn ogystal, gwnaethom ewomeiddio ein hanifeiliaid 60 munud ar ôl profi, tra bod y gwaith blaenorol yn defnyddio pwynt amser o 90 munud.Yn olaf, mewn astudiaethau blaenorol, cynhaliwyd y prawf mewn ystafell lle gallai'r anifeiliaid ymateb gydag archwaeth, ond yn ein gwaith, profwyd llygod mawr heb ymateb archwaeth.Er bod hyn yn caniatáu rhywfaint o ataliad cyflyredig, mae tystiolaeth bod caniatáu i anifeiliaid atal pwysau i gael bwyd wrth brofi a ydyn nhw'n ofni ciwiau yn creu gwrthdaro ysgogol (h.y., ofn yn erbyn gwobr), sy'n ffactor ysgogol allweddol.Cyfranogiad PVT48, 49 ..
Gwyddys bod yr amygdala basolateral yn ymwneud â chaffael ofn difodiant50,51 ac mae tystiolaeth bod amcanestyniadau bla i IL hefyd yn rhan o'r broses hon23.Fodd bynnag, nid yw'n glir a yw'r BLA a'i gysylltiadau yn rhan o'r dychweliad difodiant.Mae astudiaethau delweddu23,28 wedi dangos mwy o weithgaredd BLA mewn anifeiliaid sy'n dwyn i gof atgofion pylu.Er na ddangosodd ein gwaith blaenorol unrhyw wahaniaeth mewn actifadu BLA rhwng llygod mawr difodiant da a drwg, mae ein canlyniadau yma yn awgrymu nad yw galw difodiant yn gyffredinol yn effeithio ar BLA nac actifadu wrth ragfynegi bla il.Yn gyson â'n canfyddiadau, er bod astudiaethau trin cylched yn awgrymu bod mewnbynnau IL i'r BLA yn bwysig ar gyfer dysgu difodiant, nid ydynt yn angenrheidiol ar gyfer galw difodiant.Fodd bynnag, ni ellir anwybyddu rôl y BLA yn llwyr gan fod tystiolaeth ddiweddar yn awgrymu bod angen rhai mathau o gelloedd yn y BLA i atgynhyrchu difodiant.
Yn nodedig, ni arweiniodd dwyn i gof ofn at actifadu FOS yn y BLA, gan fod astudiaethau briw, cyffuriau a delweddu blaenorol wedi cysylltu'r maes hwn mewn mynegiant ofn a/neu ail -gydgrynhoi ofn ar ôl adfer54,55,56,57.Mae'r data a gyflwynir yma yn cyfuno subncleus gwaelodol ac ochrol yr amygdala, ac mae data blaenorol yn awgrymu bod mynegiant ofn yn gyrru gweithgaredd FOS ar ochr dorsal y niwclews ochrol.Gwnaethom ddadansoddi'r data sylfaenol ac ochrol ar wahân, ond nid oedd gwahaniaeth yn y naill achos na'r llall (ni ddangoswyd data) a chwympodd y ddau ardal yn y data yr ydym yn ei gyflwyno yma.Ni wnaethom ddadansoddi israniadau o'r amygdala ochrol, felly gellir cuddio newidiadau penodol yn yr ardal hon.Posibilrwydd arall o ddim newid mewn gweithgaredd FOS yn BLA yw oherwydd amseriad atgofion ofn o'i gymharu â chyflyru.Mae peth gwaith blaenorol wedi dangos bod cyfraniad BLA i ofni mynegiant yn lleihau gydag amser ar ôl cyflyru, fel bod mynegiant yn ddibynnol ar bla ar 24 awr ar ôl cyflyru ond yn annibynnol ar 7 diwrnod (Cyf. 45 ond gweler 58).Digwyddodd 48 awr ar ôl hyfforddi, gan wneud y diffyg newid mewn gweithgaredd FOS ar yr adeg hon yn debygol o adlewyrchu newidiadau sy'n dibynnu ar amser mewn cyfranogiad bla mewn mynegiant ofn.
Yn olaf, rydym yn dod o hyd i dystiolaeth bod cof difodiant llwyddiannus yn gysylltiedig â'r hipocampws fentrol.Mae hyn yn nodweddiadol o VHPCs “canolradd” gan na welwyd yr un patrwm yn y rhanbarth posterior.Yn gyson â gwaith blaenorol, ni chanfuom unrhyw newid yn actifadu FOS mewn ILs VHPC afferent.Mae tystiolaeth sylweddol bod angen VHPC28,60,61 er mwyn gwireddu ofn pan fydd CS yn digwydd y tu allan i'r cyd -destun y mae pylu yn digwydd ynddo, a bod hyn yn dibynnu o leiaf yn rhannol ar fynediad VHPC i IL13.Yn seiliedig ar y canlyniadau blaenorol hyn, byddem yn disgwyl i pylu gwael fod yn gysylltiedig â gweithgaredd IL a ragwelir yn fwy o VHPC.Fodd bynnag, nid oedd hyn yn wir gan nad oedd gwahaniaeth mewn gweithgaredd FOS mewn VHPCs wedi'u labelu yn ôl a ragwelir gan IL neu gelloedd heb eu labelu mewn VHPCs.Mae hyn yn awgrymu y gallai'r anallu i gofio pylu yng nghyd -destun pylu sbarduno mecanwaith gwahanol nag ofn adnewyddu.
Mae'n bwysig nodi rhai o'r cyfyngiadau dylunio a dadansoddi cynhenid ​​a sut maent yn effeithio ar ein casgliadau.Yn gyntaf, fe wnaethon ni rannu anifeiliaid yn draean uchaf ac isaf, a llygod yn “dda” a “drwg” yn seiliedig ar sgoriau galw difodiant.Gwneir hyn er mwyn osgoi cynlluniau grŵp sy'n rhannu anifeiliaid yn grwpiau ar wahân o ganol y dosbarthiad, neu gynlluniau grŵp sy'n eithrio anifeiliaid o ganol y dosbarthiad, megis gwahanu gan ganolrif neu gymhariaeth o draean uchaf ac isaf y llygod mawr .Rydym am osgoi'r sefyllfa hon oherwydd nid yw'r is -adran ganolrif yn adlewyrchu amrywioldeb ymatebion dynol i drawma yr ydym yn ceisio ei fodelu.Yn ogystal, er bod cymharu'r traean uchaf ac isaf o lygod mawr yn caniatáu inni gymharu grwpiau o faint tebyg, mae'r dull hwn yn anwybyddu anifeiliaid yng nghanol eu dosbarthu ac nid yw'n adlewyrchu amrywioldeb yn gywir mewn ymatebion i anaf.Er y gall ein dull ddioddef o broblemau gydag amrywiant heterogenaidd a chymharu grwpiau â meintiau sampl anghyfartal, mae'n cyfleu'r hyn yr ydym yn ceisio ei ddynwared yn well na dulliau amgen.
Mae'r canlyniadau a gyflwynir yma yn ein helpu i ddeall yn well sut mae gwahaniaethau unigol mewn galw difodiant yn cael eu hadlewyrchu mewn gwahaniaethau mewn gweithgaredd cylched niwral.Efallai y bydd ein canfyddiadau yn berthnasol i anhwylder straen ôl-drawmatig, y gwyddys ei fod yn gysylltiedig ag ofn gormodol ac anallu i ddileu ymatebion ofn.Rydym yn dangos bod gwahaniaethau mewn galw difodiant yn gysylltiedig â gwahaniaethau mewn gweithgaredd niwral cynhenid ​​ac anghynhenid ​​a ragamcanir ar IL.Dosbarthwyd y gwahaniaethau hyn ar draws rhanbarthau penodol ar hyd yr echel anteroposterior, gan dynnu sylw ymhellach at bwysigrwydd asesu swyddogaeth yr ymennydd ar y lefel isranbarthol.Mae anfanteision y dull cyfredol yn cynnwys perthnasedd yr astudiaeth a'r ffocws ar gnofilod gwrywaidd.Dylai ymchwil yn y dyfodol bennu'r mecanweithiau niwrobiolegol sy'n sail i ddysgu difodiant mewn cnofilod benywaidd a defnyddio dulliau i ddod i gasgliadau achosol.
Mae'r setiau data a ddefnyddir a/neu a ddadansoddwyd yn yr astudiaeth gyfredol ar gael gan yr awduron priodol ar gais rhesymol.
Cyflyru IP Pavlov: Astudiaeth o weithgaredd ffisiolegol y cortecs cerebrol.(Gwasg Prifysgol Rhydychen, 1927).
Rothbaum, BO, & Davis, M. Cymhwyso egwyddorion dysgu i drin adweithiau ôl-drawma. Rothbaum, BO, & Davis, M. Cymhwyso egwyddorion dysgu i drin adweithiau ôl-drawma.Rotbaum Bo a Davis M. Cymhwyso egwyddorion dysgu i drin adweithiau ôl-drawmatig.Rotbaum Bo a Davis M. Cymhwyso egwyddorion dysgu wrth drin adweithiau ôl-drawmatig.gosod.Coleg Efrog Newydd.y wyddoniaeth.1008 (1), 112-121 (2003).
Rauch, SA, EFTEKHARI, A. & RUZEK, JI Adolygiad o Therapi Amlygiad: Safon Aur ar gyfer Triniaeth PTSD. Rauch, SA, EFTEKHARI, A. & RUZEK, JI Adolygiad o Therapi Amlygiad: Safon Aur ar gyfer Triniaeth PTSD.Mae Rauch SA, EFTEKHARI A. a RUZEK DI yn adolygiad o therapi amlygiad: y driniaeth safonol aur ar gyfer anhwylder straen ôl -drawmatig. Rauch, SA, EFTEKHARI, A. & RUZEK, JI 暴露 疗法 ： PTSD 治疗 的 黄金 标准 标准。 Rauch, SA, EFTEKHARI, A. & RUZEK, JI Adolygiad o Therapi Amlygiad: Y Safon Aur ar gyfer Triniaeth PTSD.Rauch, SA, Eftekhari, A. a Ruzek, Di Adolygiad o Therapi Amlygiad: Y Driniaeth Safon Aur ar gyfer Anhwylder Straen Ôl -drawmatig.J. Adsefydlu.Datblygu Cronfa Ddŵr 49, 679–687.https://doi.org/10.1682/jrrd.2011.08.0152 (2012).
FoA, EB Therapi amlygiad hir: y gorffennol, y presennol a'r dyfodol.Gormes pryder 28, 1043–1047.https://doi.org/10.1002/da.20907 (2011).
Millard et al.Achosion dirfodol a chaffaeledig colli cof mewn anhwylder straen ôl-drawmatig: canfyddiadau o astudiaeth gefell.J. Seiciatrydd.tanc storio.42 (7), 515-520 (2008).
Millard et al.Sail niwrobiolegol yr anallu i ddwyn i gof atgofion pylu mewn anhwylder straen wedi trawma.Bioleg.Seicoleg.66 (12), 1075-1082 (2009).
Bush, DEA, SOTRES-BAYON, F. & LEDOUX, JE Gwahaniaethau Unigol mewn Ofn: Ynysu Adweithedd Ofn a Ffenoteipiau Adfer Ofn. Bush, DEA, SOTRES-BAYON, F. & LEDOUX, JE Gwahaniaethau Unigol mewn Ofn: Ynysu Adweithedd Ofn a Ffenoteipiau Adfer Ofn.Bush, Dea, Sautre-Bailon, F. a Ledoux, Je Gwahaniaethau Unigol mewn Ofn: Gwahaniaethu Ffenoteipiau o Adweithedd Ofn ac Adfer Ofn. Bush, Dea, Sotres-Bayon, F. & Ledoux, JE 恐惧 的 个体 ： 隔离 恐惧 反应 和 和 恐惧 恢复 表型 表型。。 Bush, DEA, SOTRES-BAYON, F. & LEDOUX, JE Gwahaniaethau Unigol mewn Ofn: Ynysu Ymateb Ofn a Tabl Adfer Ofn.Bush, Dea, Sautre-Bailon, F. a Ledoux, Je Gwahaniaethau Unigol mewn Ofn: Arwahanrwydd Ymatebion Ofn a Ffenoteip Adfer Ofn.J. Trawma.Pwysedd 20 (4), 413–422 (2007).
Mae Russo, As & Parsons, ymateb cychwynnol acwstig RG mewn llygod mawr yn rhagweld amrywiad rhyng-unigol mewn difodiant ofn. Mae Russo, As & Parsons, ymateb cychwynnol acwstig RG mewn llygod mawr yn rhagweld amrywiad rhyng-unigol mewn difodiant ofn.Mae Russo, As a Parsons, ymateb cychwynnol acwstig RG mewn llygod mawr yn rhagweld gwahaniaethau unigol mewn difodiant ofn. Russo, as & parsons, rg 大鼠 的 声学 惊吓 反应 预测 恐惧 消退 的 的 个体 差异。。 Russo, As & Parsons, RGMae Russo, As a Parsons, ymateb cychwynnol acwstig RG mewn llygod mawr yn rhagweld gwahaniaethau unigol mewn difodiant ofn.Niwrobioleg.astudio.Cof.139, 157–164 (2017).
Mae Russo, fel, Lee, J. & Parsons, RG amrywioldeb unigol wrth ddwyn i gof ofn difodiant yn gysylltiedig â ffosfforyleiddiad protein kinase protein wedi'i actifadu gan mitogen yn y cortecs infralimbig. Mae Russo, fel, Lee, J. & Parsons, RG amrywioldeb unigol wrth ddwyn i gof ofn difodiant yn gysylltiedig â ffosfforyleiddiad protein kinase protein wedi'i actifadu gan mitogen yn y cortecs infralimbig.Mae Russo, fel, Lee, J. a Parsons, RG amrywioldeb unigol mewn ofn yn dwyn i gof bod difodiant yn gysylltiedig â ffosfforyleiddiad protein kinase wedi'i actifadu gan mitogen yn y cortecs infralimbig. Russo, fel, Lee, J. & Parsons, rg 回忆 恐惧 消退 的 个体 差异 与 边缘 下 皮质 中 中 丝 裂原 活化 活化 蛋白 激酶 的 磷酸化 有关。。 Russo, fel, Lee, J. a Parsons, RG Mae gwahaniaethau unigol mewn difodiant ofn yn ystod dwyn i gof yn gysylltiedig â ffosfforyleiddiad cinases protein wedi'u actifadu gan mitogen yn y cortecs aelod isaf.Psychopharmacology 236 (7), 2039–2048 (2019).